椰子致死黄化植原体病是怎样检验与检疫的？

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鉴别寄主：长春花：将介体昆虫麦蜡蝉在可疑的植物上取食后，接种长春花，可诱发产生植原体病害的典型症状，但潜伏期较长。

电镜观察：用电镜观察，在感病椰子树韧皮部筛管细胞内可见植原体的存在，形状包括丝状、念珠状及近球状，在新近成熟的韧皮部筛管细胞中常见有植原体，而在薄壁组织中未见。

分子生物学检测：目前常用核酸杂交、植原体保守序列16srDNA的PCR及嵌套PCR检测技术，以及异源双链迁移率分析（HMA）技术来检测植原体。Harrison等1992年报道，用5种DNA探针，可用于椰子和其他棕榈科植物上的椰子致死黄化植原体的检测；RohdeW等1993年报道，应用PCR技术成功的检测了椰子致死黄化植原体。

检疫危险性评价：本病的病原椰子致死黄化病植原体，可经椰子繁殖材料进行远距离传播，对椰子可构成严重危害。国内尚未发生。季良进行危险性评价时，危险度值9分，为高危检疫性有害生物。我国已列入进境植物检疫潜在危险性有害生物名单。

地理分布：在加勒比海地区至少已有100年的历史，在西非也有50年的历史。美国佛罗里达州南部的基韦斯特岛首次报道此病。目前分布在美洲的美国、墨西哥，拉丁美洲的开曼群岛、巴哈马群岛、古巴、多米尼加、海地，非洲大部，西印度群岛，以及亚洲的印度尼西亚、马来西亚等国家。

检疫国家地区：中国、菲律宾、印度、美国、澳大利亚、阿尔及利亚、冰岛、摩洛哥、斯洛伐克等。

鉴别寄主：长春花。电镜和荧光显微镜观察：以根和茎作材料，进行荧光显微镜观察，在筛管中有荧光反应，根的菌体浓度高于茎，病树含菌体少，仅在靠近形成层的有功能筛管中见到菌体，已病死的筛管中不见菌体（SeemüllerandLederer，1988）。电镜下见到菌体，可确定形态和大小。分子生物学检测：巢状-PCR检测，分别用P1/P7和F2n/R2引子对，后者的扩增产物为1.2kbp节分（Valiunasetal.，2001）。探针检测，用同属的榆丛枝植原体（繁殖在长春花病株上）的未消解DNA，获得3个重组体质粒（ULW13，21，23，大小为0.8，1.7和3.5kb）制备的探针，用DNA印迹杂交法检测。检疫危险性评价：本病的病原桤木黄化植原体，可由桤木无性繁殖材料远距离传播和田间由叶蝉传播蔓延，对桤木可构成严重经济损失。季良进行危险性评价时危险度值9分，为高危检疫性有害生物。国内尚未发生，已列入中华人民共和国进境植物检疫性有害生物名录（2007年）。检疫措施：进口时须经国家质量监督检验检疫总局特许审批，限量进口，并要求附有出口国《检疫证书》，保证不带此类病原。入境后须经指定的隔离检疫站进行1年以上生育期检验，确认无病者，交还进口货主，并在隔离条件下繁殖无病种苗，才允许用于生产种植。

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